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論述熒光分光光度計的原理及特征
發(fā)布時間：
2018-03-09 00:00
熒光分光光度計的原理
熒光分光光度計的定義：有些物質(zhì)被紫外線或可見光激發(fā)，比激發(fā)光波發(fā)出更長的光。熒光產(chǎn)生的原理是化學(xué)物質(zhì)能從外界吸收并儲存能量并進入激發(fā)態(tài)。當(dāng)從激發(fā)態(tài)恢復(fù)到基態(tài)時，多余的能量可以以電磁輻射的形式輻射。
熒光化合物的兩種特征光譜
1、熒光激發(fā)光譜是通過測量熒光粉的光通量獲得的光譜。它反映了不同波長誘導(dǎo)熒光的相對效率。
2、熒光發(fā)射光譜，如激發(fā)光波長和強度保持不變，使熒光物質(zhì)的發(fā)射單色器照射后產(chǎn)生在檢測器上，掃描單色儀和相應(yīng)的檢測波長的熒光強度，然后通過記錄器記錄曲線的發(fā)射波長的熒光強度，頻譜表示熒光光譜。
該材料的激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜可作為該物質(zhì)的定性分析。當(dāng)激發(fā)強度、波長、溶劑和溫度條件固定時，物質(zhì)的發(fā)射強度與物質(zhì)在一定濃度范圍內(nèi)的濃度成正比，可用于定量分析。
熒光分析的靈敏度一般是紫外分光光度法或比色法、溶液的濃度太大，會“自行消亡”，以及對附近的溶液的液體表面會吸收激發(fā)光，發(fā)光強度降低，導(dǎo)致熒光強度與濃度不到熒光分析法比例應(yīng)在低濃度的溶液中進行。
熒光發(fā)射的特點是，分子或原子能產(chǎn)生熒光，在接收到能量后立即發(fā)光，一旦能量停止，發(fā)光現(xiàn)象（熒光）瞬間消失。
熒光的猝滅：長時間照射后，熒光分子的輻射能力會減弱甚至熄滅。這是因為激發(fā)態(tài)分子的電子不能還原為基態(tài)，吸收的能量不能以熒光的形式傳遞。某些化合物具有天然熒光猝滅作用，可用作猝滅劑以消除不需要的熒光。因此，應(yīng)注意保護熒光物質(zhì)，避免直接接觸光（特別是紫外線）和與其他化合物接觸。
熒光效率：熒光分子不可能將所有吸收的光能轉(zhuǎn)換成熒光，而熒光則或多或少地以其他形式釋放。熒光效率是指將熒光能量吸收到熒光中的熒光分子的百分比，它與熒光光量子的發(fā)射量成正比。
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