紫外可見分光光度計的三種應(yīng)用說明
發(fā)布時間:
2024-09-20 17:20
紫外可見分光光度計是一種用于測量物質(zhì)吸收或透射光的儀器。它利用紫外和可見光譜范圍內(nèi)的電磁輻射對樣品進(jìn)行分析。
紫外可見分光光度計的工作原理是利用樣品對特定波長的光的吸收來確定物質(zhì)的濃度。通過根據(jù)比例關(guān)系計算吸光度,可以得到樣品的吸光譜。根據(jù)吸光譜的特征,可以判斷樣品中是否存在特定的化合物,了解樣品的組成和濃度。
通常具有高靈敏度、較高的分辨率和波長精度。用戶可以根據(jù)需要選擇不同波長范圍的儀器,以適應(yīng)不同樣品的測量要求。在實驗室中,UV-Vis分光光度計常用于分析有機化合物、生物分子、金屬離子等物質(zhì),是一種非常重要的分析儀器。
這種儀器通常包括一個光源,如氙燈或鎢燈,用于產(chǎn)生紫外和可見光。光通過一個光柵或棱鏡進(jìn)行分散,然后經(jīng)過樣品,進(jìn)入一個探測器,例如光電二極管或光電倍增管。探測器測量從樣品傳遞的光,并將其轉(zhuǎn)換為電信號。
使用紫外可見分光光度計,可以確定不同波長下的物質(zhì)吸收特性。這些數(shù)據(jù)可以用于定量分析,例如測量溶液中特定成分的濃度,或用于質(zhì)量控制和研究應(yīng)用,如藥物分析、環(huán)境監(jiān)測和生物化學(xué)實驗等。
紫外可見分光光度計的工作原理基于朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律,即物質(zhì)在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比,其應(yīng)用波長范圍為200~400nm的紫外光區(qū)、400~850nm的可見光區(qū)。
本儀器主要由輻射源(光源)、色散系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。
紫外可見分光光度計的應(yīng)用:
1、檢定物質(zhì):
根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收,特別是最大吸收波長雖ax和摩爾吸收系數(shù)澹 是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外的藥典中,已將眾多的藥物紫外吸收光譜的最大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中,為藥物分析提供了很好的 手段。
2、與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照:
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中,在同一條件下分別測定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì),則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣,也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對照進(jìn)行比較。 這種方法要求儀器準(zhǔn)確,精密度高,且測定條件要相同。
3、比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性:
由于紫外吸收光譜只含有2~3個較寬的吸收帶,而紫外光譜主要是分子內(nèi)的發(fā)色團(tuán)在紫外區(qū) 產(chǎn)生的吸收,與分子和其它部分關(guān)系不大。具有相同發(fā)色團(tuán)的不同分子結(jié)構(gòu),在較大分子中不影響發(fā)色團(tuán)的紫外吸收光譜,不同的分子結(jié)構(gòu)有可能有相同的紫外吸收光譜,但它們的吸 收系數(shù)是有差別的。如果分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸收波長相同,吸收系數(shù)也相同,則可認(rèn)為分析樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品為同一物質(zhì)。
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