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      熒光光度計通常是由這四個部分組成

      發(fā)布時間:

      2022-07-20 11:25


        熒光光度計是常見的實驗儀器,主要用于對經(jīng)光源激發(fā)后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)或經(jīng)化學處理后產(chǎn)生熒光的物質(zhì)成份分析。在檢測食品、自然環(huán)境污染等重要的人類課題上,發(fā)揮積極的作用。熒光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,有濾光片熒光計、濾光片-單色器熒光計等。

        目前,熒光光度計在各個領域內(nèi)得到廣泛應用:諸如有機電致發(fā)光和液晶等工業(yè)材料;水質(zhì)分析等環(huán)境相關領域;熒光試劑的合成與開發(fā)等制藥領域;細胞內(nèi)鈣離子濃度測定等生物技術相關領域。

        熒光光度計通常是由以下四個部分組成:樣品池、檢測器、單色器以及激發(fā)光源。

        1、樣品池:

        熒光分析用的樣品池須用低熒光材料制成,通常用石英,四面均透光。形狀有正方形、長方形或圓形,但常用正方形樣品池,因其散射干擾較少。

        2、檢測器:

        熒光光度計中的檢測器有較高的靈敏度,一般用光電倍增管(PMT)做檢測器。為了除去激發(fā)光對熒光測量的干擾,在儀器中,檢測光路與激發(fā)光路是相互垂直的。

        3、單色器:

        熒光分析儀器有兩個單色器,激發(fā)單色器和熒光單色器。di一個單色器的作用是將不需要的光除去,使需要的激發(fā)光透過而照射到樣品池,第二個濾光片將由激發(fā)光所發(fā)生的反射光、瑞利散射光、拉曼散射光和由溶液中雜質(zhì)所發(fā)生大多數(shù)的熒光濾去。濾光片熒光計采用濾光片做單色器,結(jié)構(gòu)簡單,價格便宜,用于已知組分樣品的定量分析,不能提供激發(fā)光譜或熒光光譜。熒光光度計都采用光柵分光,可以獲得單色性好的激發(fā)光,并能分出某一波長的熒光,以減少干擾,而且可以掃描激發(fā)光譜或熒光光譜。

        4、激發(fā)光源:

        對激發(fā)光源主要考慮其穩(wěn)定性和強度,因為光源的穩(wěn)定性直接影響測量的重復性和精確度,而光源的強度又直接影響測定的靈敏度。熒光測量中常用的光源包括高壓汞燈或氙燈。氙燈產(chǎn)生強烈的連續(xù)輻射,其波長范圍在250~700nm;高壓汞燈發(fā)射365nm、405nm、436nm、546nm、579nm、690nm和734nm的線狀譜線,測量中常用365nm、405nm、436nm三條譜線。目前大部分熒光光度計都采用150W和500W的氙燈作光源;現(xiàn)代熒光儀器有采用12V50W的新型溴鎢燈作光源,在300~700nm波段發(fā)射連續(xù)光譜。此外,20世紀70年代開始用激光作為激發(fā)光源,激光光源單色性好、光強度大、脈沖激光的光照時間短,可以避免某些感光物質(zhì)的分解。

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